古代经典名方是如今中药行业的大热门，尤其是在去年《中药注册管理专门规定》更新定调，再加上年底《古代经典名方关键信息表（7首方剂）》发布，年将是古代经典名方研发取得阶段性成果的关键时期。做好年至今这几年来研发数据的整理，实验思路更应开阔，古今合璧，借助现代分析技术持续完善申报资料，将在未来申报中更有底气。笔者就自身经验浅谈几点研发之路上非常容易踩雷的坑，希望对大家的工作稍有帮助：
（一）弱无紫外吸收成分的表征：
这一点经常有人忽视，因为大家最熟悉的就是使用液相色谱仪，配置紫外或者二极管阵列检测器，以建立nm波长下的指纹图谱作为该方的主指纹图谱，在此基础上去寻找各个药味的定性或者定量指标。但是仔细研读过申报资料的老师应该注意到，尤其是关键质量指标的选取，一定要与功效挂钩。
比如*芪甲苷，活性多样，是药味*芪的活性成分，由于没有紫外吸收，药典中使用ELSD法进行含量测定并规定了含量的范围，在经典名方同样出现多次，典型的有：升陷汤等。在这类经典名方的研发中，势必需要选择通用型检测方法对*芪甲苷进行测定，目前文献报道的通用型检测方法有：HPLC-ELSD法或者HPLC-CAD法等，也有使用单杆质谱的案例。
笔者仔细看了一下《古代经典名方关键信息表（7首方剂）》公开的方剂详细内容，仍以升陷汤为例：
该方包含5味中药：*芪/知母/柴胡/桔梗/升麻，版中国药典规定的质量控制指标和文献报道的活性成分见下表：
药味名称药典质控指标文献报道活性成分*芪*芪甲苷/毛蕊异*酮葡萄糖苷芒柄花*素/异*芪皂苷2等知母芒果苷/知母皂苷B2新芒果苷/知母皂苷B3等柴胡柴胡皂苷a/柴胡皂苷d柴胡皂苷b1/柴胡皂苷C等
桔梗桔梗皂苷D桔梗皂苷D3/桔梗皂苷E等升麻异阿魏酸咖啡酸/升麻素苷等可以看出升陷汤发挥益气升陷功效的药效物质基础多为紫外吸收并不明显的皂苷类成分，所以建立升陷汤的指纹图谱就千万不能仅以nm谱图为主，至少要加上nm谱图，甚至要加上通用型检测器采集的图谱。既涵盖以毛蕊异*酮葡萄糖苷为首的紫外吸收活性成分，还要注意*芪甲苷/知母皂苷等弱无紫外吸收成分的表征，定性定量分析经必要性论证后纳入申报资料，这样经典名方申报资料的指纹图谱部分将更加完善，更加科学，更加合理。
提到与紫外检测器（VWD/DAD）能有效互补的通用性检测器有：(1)示差检测器RI：使用较为简单，只能兼容等度洗脱的方法，如果单糖/二糖分析可选用该检测器，中药人用的不多；(2)蒸发光散射检测器ELSD：经久不衰的经典检测器，药典里有具体的应用实例，使用难度适中，近年来因灵敏度/稳定性/重复性等问题稍稍为人诟病，在中药分析领域使用较为广泛；(3)电雾式检测器CAD：赛默飞独家检测器，灵敏度等参数均优于前两种通用型检测器，目前版中国药典四部通则已收录并进行了简要描述，苦于国内药典中尚没有应用实例而暂时受限，应用范围广，有逐步替换RI/ELSD常规检测方法的趋势。
如果老师的色谱方法中使用的流动相体系不含有非挥发性盐和酸，可以考虑将紫外检测器与蒸发光散射检测器或者电雾式检测器串联使用，将一次进样获得更多的表征信息，不失为一种事半功倍的研究方法。
（二）HPLC方法转换成UHPLC：
现在各家仪器公司配套使用的数据管理系统都有很方便的方法转换计算器，真的不要再分别摸索HPLC/UHPLC方法了，太浪费大家的宝贵时间。自带的在线或离线的方法转换计算器实际上都差不多，原理都是根据体积梯度原理，修改转换前后的色谱柱规格信息就可以直接获得UHPLC梯度方法，再进行简单微调应该就可以了。有两点需要提醒大家注意：1.方法转换前后的两根色谱柱尽可能保证相同的填料，这样转换后的谱图可以实现快速指认，出峰顺序不会有较大的变化；2.如在药厂里，做药典方法的方法转换，还是需要遵守中国药典通则或者美国药典通则哦。
（三）方法转移：小试至中试
无论是研究院开发的色谱方法还是外包给高校开发的古代经典名方方法，都会遇到方法转移的问题，这一点目前还没有见到专家重点提及。而就实践经验来看，方法转移真的完全没那么容易，尤其是关系到量值传递的问题的时候，真的请各位老师将目光